傷寒桿菌O菌液(肥達氏、外斐氏實驗試劑)

傷寒桿菌O菌液(肥達氏、外斐氏實驗試劑)

傷寒、副傷寒及變形菌診斷菌液(使用說明書)

本品系用溶液滅活的傷寒、副傷寒即變形桿菌分別制成,供肥達氏(Widal)和外斐氏(Weil-Felix)反應用。

 

濃度:7.0*109/ml

 

使用方法:

以生理鹽水溶液稀釋成含菌7.0*108/ml的懸液。將待檢血清稀釋成1:10、1:20……1:1280(每管0.5ml),然后逐管分別加入稀釋菌液各0.5ml,最后血清稀釋度為1:20、1:40……1:2560,充分震蕩使其混勻,于35-37℃放置16-20小時,判定結果。

根據凝集反應的強弱或有無,分別以++++、+++、++、+、-記錄,以清晰見到凝集反應(+)的最高稀釋度為凝集效價。

 

保存:2-8℃避光保存,在有效期內使用

 

注意事項:

1.??????應在光亮處先觀察管底凝集狀態,然后輕輕搖動判定結果。

2.??????菌液稀釋后應及時使用。

3.??????菌液有搖不散的凝塊時,不能使用。

 

 

肥達凝集試驗

 

標本準備:血清,靜脈血3ml不抗凝。

 

原理:用已知傷寒沙門菌菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原及甲、乙、丙3種副傷寒沙門菌鞭毛抗原的診斷菌液,與被檢血清作細菌凝集反應。若被檢血清中有抗體存在,可與相應抗原起反應,出現肉眼可見的凝集現象為陽性。

 

試劑:診斷菌液有傷寒O、H及副傷寒A、B、C,共5種。

使用時用生理鹽水稀釋成每毫升含7~10億(7*108~1*109)個菌的懸液備用。

 

檢測步驟:

1.取lOmm×lOOmm試管5排,每排8支。

2.另取15mm×lOOmm試管1支,加生理鹽水4.75m1及患者血清0.25ml混合,成為1:20稀釋血清。

3.每排第l管內各加1:20稀釋血清0.5ml。

4.在剩余的2.5ml稀釋血清(1:20)中加人生理鹽水2.5ml,成為1:40稀釋血清。

5.再取1:40的血清,分別加入每排第2管中,每管0.5ml。在剩余的2.5ml稀釋血清(1:40)中,加入生理鹽水2.5ml,成為1:80稀釋,再加入每排第3管中,每管0.5ml,如此操作,直至加完每排第7管為止。

6.每排最后1管各加生理鹽水0.5ml,作為不含血清的菌液對照。

7.取5種菌液充分搖勻,每種菌液加1排,血清最終稀釋度分別為1:40、1:80、1:160直至1:2560。振蕩混合,置37C水浴16~20h后觀察結果。

 

結果判斷:

先觀察液體部分清晰程度,然后輕輕搖動試管,觀察管底有無凝塊浮起:

1.液體澄清、管底有凝塊、細菌完全凝集者(100%凝集),為柵++++。

2.液體微混濁、管底有明顯凝塊、細菌大部分凝集者(75%凝集),為+++。

3.液體較混濁、管底有明顯凝塊、細菌中度凝集者(50%凝集),為++。

4.液體混濁、管底無凝塊、細菌輕度凝集者(25%凝集),為+。

5.液體混濁、無凝集現象,為陰性。

6.對照管均勻混濁無凝集現象。

7.被檢血清出現++凝集的最高稀釋倍數為凝集效價。如第3管出現仲凝集,則判為1:160陽性;如各管均無凝集現象,則判為<l:40。

 

正常參考值:傷寒沙門H凝集效價1:80以下,傷寒沙門菌O凝集效價及各型副傷寒沙門H凝集效價均在1:40以下。

 

注意事項:

1.過去曾預防接種傷寒、副傷寒疫苗者,H抗體效價明顯升高,并持續數年,而O抗體低于正常值。

2.以往患過傷寒病或曾接種傷寒疫苗,新近又感染流行性感冒或布魯病,可產生高效價H抗體,O抗體則較低,但H抗體很快消失,此種反應稱回憶反應。

3.由于人們在日常生活中可能發生隱性感染而產生抗體,尤其在流行地區正常人的凝集效價可稍高,故在判斷結果時應考慮本地區正常人群的自然凝集效價水平作為參考。

4.沙門菌屬各菌種之間有某種共同抗原,在凝集試驗中可能出現類屬交叉凝集反應,但效價較低。

5.陰性結果不能完全排除傷寒的可能,應注意有10%左右已確診為傷寒者在整個病程中抗體效價始終不升高。這可能與早期應用抗生素、藥物抑制、免疫耐受和缺陷有關。

6.肥達反應特異性不高,機體免疫功能紊亂、結核、敗血癥、病毒性肝炎及部分血吸蟲患者可出現假陽性反應。

7.溶血、菌液過濃等均會影響結果。菌液過期或產生自凝者不宜使用。

 

 

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肥達氏實驗試劑(目錄)

抗傷寒桿菌H血清

抗傷寒桿菌O血清

傷寒桿菌H菌液

傷寒桿菌O菌液

甲型副傷寒桿菌菌液

乙型副傷寒桿菌菌液

丙型副傷寒桿菌菌液