ISOSPIN Plant RNA


產品編號 產品名稱 產品規格 產品等級 產品價格
310-08171 ISOSPIN?Plant?RNA 50次用量

從植物組織提取RNA試劑盒

ISOSPIN Plant RNA


      ISOSPIN Plant RNA


  ISOSPIN Plant RNA用于從植物組織提取和純化RNA。本產品的原理是在離液劑離子條件下,RNA吸附于二氧化硅。無需苯酚和氯仿等有毒有機溶劑。所使用的離心柱最大限度地確保了柱容積,內封的硅膠模確保足夠的RNA吸附容量和高洗脫率。
  本試劑盒采用離心法去除雜物,在硅膠模上進行DNase I處理,提取和純化高純度RNA用時僅約1小時。



◆特點


  ? 高純度RNA

  離心法去除雜物和硅基質膜上的DNase I 處理能提取出高純度RNA。

  ? 無需使用過濾器

  無需使用過濾器樣品均勻化或過濾時后。本試劑盒用離心法去除雜物沉淀。

  ? 無需苯酚、氯仿

  無需使用苯酚、氯仿等有毒有機溶劑。

  ? 包裝附有DNase I

  試劑盒內含有DNase I (RNase free),不需另外購買。


◆產品列表

ISOSPIN Plant    RNA (50次用量)

產品

容量

保存

備注

PT Extraction   Buffer

30 ml x 1支

室溫

PT Binding   Buffer

40 ml x 1支

室溫

含乙醇

PT Wash1   Buffer

40 ml x 1支

室溫

含乙醇(清洗液)

PT Wash2   Buffer

40 ml x 1支

室溫

含乙醇(清洗液)

DNase I (RNase   free)

2,000 units x   1支

-20°C

10 x DNase I   Buffer

1 ml x 1支

-20°C

ddWater (RNase   free)

1 ml x 8支

室溫

調制DNase I 溶液?洗提

離心柱

50 支 x 1袋

冷藏

上端組成:吸附柱
下端組成:收集管

運送方法


  NIPPON GENE提供直送服務,將室溫品和冷藏品的試劑盒、-20°C的產品、放入干冰的泡沫箱一同放入紙箱,在常溫下進行運輸。



◆使用實例


ISOSPIN Plant RNA


Data.1 RNA的回收量標準

  本產品可提取的RNA的回收量標準如下表。

樣品


菠菜(葉)

0.5 μg RNA/mg 組織

青花菜(芽)

1.0 μg RNA/mg組織

卷心菜(種子)

1.3 μg RNA/mg組織

卷心菜(芽)

1.4 μg RNA/mg組織

卷心菜(葉)

0.1 μg RNA/mg組織

竹子(葉)

0.3 μg RNA/mg組織

郁金香(球根)

0.2 μg RNA/mg組織

Data.2 從卷心菜(十字花科)種子及從葉子提取RNA

  使用ISOSPIN Plant RNA與其他公司產品按照步驟提取卷心菜的種子(約4mg)和葉(約30mg)的RNA。用吸收光譜和凝膠電泳對提取出的RNA進行比較。以提取出的總RNA為模板逆進行轉錄,使用GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX對獲得的cDNA進行實時qPCR。

實驗條件

1.  樣品量
  ?種子(約4 mg)
  ?葉(約30 mg)

2.  變性凝膠電泳
  ?凝膠:1% Agarose S(甲醛變性)
  ?RNA添加量:種子(1μg)/葉(0.5μg)
  ?RNA Ladder:與RNA添加量等量

3.  實時qPCR
  ?試劑:GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX
  ?裝置:ABI 7500 Fast
  ?模板cDNA:以提取出的總RNA為模板進行逆轉錄
  ?擴增片段長度:441 bp
  ?實驗次數: n=3

結果

  從吸收光譜結果看,在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低,說明本產品更能有效去除多糖類雜物(圖1)。

卷心菜種子 卷心菜葉
ISOSPIN Plant RNA ISOSPIN Plant RNA
圖1 吸收光譜

ISOSPIN Plant RNA

ISOSPIN Plant RNA





【RNA添加量】

  種子(1μg)/葉子(0.5μg)


【Marker】
  RNA Ladder(與RNA的添加量等量)
  1% Agarose S(甲醛變性)

圖2 變性凝膠電泳

卷心菜種子 卷心菜葉
ISOSPIN Plant RNA ISOSPIN Plant RNA
圖3 實時qPCR

【試劑】

  GeneAce SYBR? qPCR Mix α Low ROX

【模板】

  以提取出的總RNA為模板進行逆轉錄

【裝置】ABI 7500 Fast

【擴增片段長度】441 bp

【循環數】n=3

紅色: ISOSPIN Plant RNA
綠色: A公司產品



Data.3 從竹子(禾本科)愈傷組織提取RNA

   ISOSPIN Plant RNA

        竹子愈傷組織

  (淡竹培養細胞系Pn(rpc00047)形成)

  使用ISOSPIN Plant RNA與其他公司產品,按照步驟對各樣品量竹子愈傷組織提取RNA。通過吸收光譜和凝膠電泳對提取出的RNA進行比較。以提取出的總RNA為模板進行逆轉錄,使用GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX對獲得的cDNA進行實時qPCR。

  ※本實驗使用的竹子愈傷組織由富山縣立大學荻田信二郎博士(現公立大學法人縣立廣島大學)提供。竹子愈傷組織委托理化學研究所BioResource Center獲得的淡竹培養細胞系Pn(rpc00047)培養形成的。

實驗條件

1.  樣品量
  ① 約65 mg
  ② 約50 mg
  ③ 約40 mg

2.  瓊脂糖凝膠電泳
  ?凝膠:0.8% 瓊脂糖 S/TAE
  ?RNA添加量:最終提取量的1/10(5 μl)
  ?Marker:OneSTEP Marker6(5 μl)

3.  實時qPCR
  ?試劑:GeneAce SYBR? qPCR Mix α Low ROX
  ?裝置:ABI 7500 Fast
  ?模板cDNA:以提取的總RNA為模板進行逆轉錄
  ?擴增片段長度:197 bp
  ?循環數: n=3

結果

  從吸收光譜結果看,在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低,說明更能有效去除多糖類雜物(圖1)。根據瓊脂糖凝膠電泳比較結果顯示,ISOSPIN Plant RNA更有效提取出RNA(圖2)。

ISOSPIN Plant RNA ISOSPIN Plant RNA
圖1 吸收光譜 圖2 變性凝膠電泳

【凝膠】

  0.8% 瓊脂糖 S/TAE

【RNA添加量】

  最終提取量的1/10(5 μl)

【Marker】

  OneSTEP Marker6(5 μl)

ISOSPIN Plant RNA



【試劑】GeneAce SYBR? qPCR Mix α Low ROX


【裝置】ABI 7500 Fast


模板cDNA】以提取出的總RNA為模板進行逆轉錄


【擴增片段長度】197 bp


【循環數】n=3

圖3 實時qPCR

Data.4 從郁金香(百合科)球根中提取RNA

    ISOSPIN Plant RNA ISOSPIN Plant RNA

                  提取液的粘性狀態
              左:ISOSPIN Plant RNA
              右:B公司產品

  使用ISOSPIN Plant RNA與B公司產品,按照步驟對郁金香球根(100mg)提取RNA。通過吸收光譜和凝膠電泳對提取出的RNA進行比較。以提取出的總RNA為模板進行逆轉錄,使用GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX對獲得的cDNA進行實時qPCR。

  郁金香球根樣品粘性高,提取困難。郁金香球根在液氮中碎成粉末狀后,取1.5ml移至離心管,并在各公司提取Buffer中用研磨棒磨碎,右圖將離心管倒置比較溶液的粘性。

實驗條件

1.  樣品量

  100 mg

2.  瓊脂糖凝膠電泳
  RNA添加量:最終提取量的1/10(5 μl)

結果

  ISOSPIN Plant RNA也能從粘性高的郁金香球根提取出RNA。

ISOSPIN Plant RNA ISOSPIN Plant RNA
 最終提取量的1/10(5 μl)
圖1吸收光譜 圖2 瓊脂糖凝膠電泳

◆備注

  

  · 本產品僅用于實驗研究,不能作醫藥及其他目的使用。

◆資料 Data Sheet

產品指南

  ·ISOSPIN Plant RNA(PDF 299KB)


SDS(Safety Data Sheet)

  ·ISOSPIN Plant RNA (PDF)


宣傳冊子

  ·ISOSPIN Plant RNA宣傳冊子(PDF 2.7MB)

◆相關產品

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  ·ISOSPIN Agarose Gel (純化瓊脂糖凝膠的DNA)

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